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一、知識點總結(jié)
微生物生長的測定方法有多種，根據(jù)研究對象或目的選擇。
1.總細胞計數(shù)法
(1)血球計數(shù)板法：血球計數(shù)板中央有一個體積一定的計數(shù)室(0.1mm3)。將菌懸液或孢子懸液在顯微鏡下計數(shù)，然后再按一定公式計算出細菌總數(shù)。(顯微鏡直接計數(shù)法)
(2)涂片計數(shù)法：將一定體積(0.1ml)的樣品，均勻地涂在載片的一定面積內(nèi)(1cm2)。在顯微鏡下計算細胞數(shù)量，推算1cm2所含細胞數(shù)目。
(3)比濁法：菌體細胞培養(yǎng)液混濁，在一定范圍內(nèi)，菌體數(shù)量與渾濁成正比，故可通過分光光度計或比色計求出渾濁度，通過與標準曲線對比，求出樣品中菌液濃度，算出個體數(shù)。特點：所得結(jié)果包括死菌和活菌。
2.間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)
(1)涂布平板法：用滅菌的涂布器將一定體積(不大于0.1ml)的適當稀釋度的菌液涂布在瓊脂培養(yǎng)基的表面，然后保溫培養(yǎng)直到菌落出現(xiàn)，記錄菌落的數(shù)目并換算成每毫升試樣中的活細胞數(shù)量。
(2)倒平板法：將樣品稀釋到一定濃度，取一定體積(0.1-1ml)倒入冷卻至45℃的固體培養(yǎng)基混合，制成平板，培養(yǎng)后，出現(xiàn)菌落，由菌落數(shù)推算出的菌總數(shù)。
(3)濾膜過濾法：樣品通過微孔濾膜后，細菌收集在濾膜上，然后將濾膜放在培養(yǎng)基中培養(yǎng)，通過菌落計數(shù)求出樣品活菌落。
二、記憶小貼士
1.顯微鏡直接計數(shù)法的原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。(缺點是不能區(qū)分死菌與活菌)
2.間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)：當樣品的稀釋度數(shù)足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。(注意：樣品稀釋度。一個活細胞形成一個菌落。)
三、經(jīng)典例題
對微生物細胞數(shù)目進行檢測時，不屬于總細胞計數(shù)法的方法是( )。
A.比濁法 B.涂片計數(shù)法 C.涂布平板法 D.血球計數(shù)板法
【答案】C。解析：對微生物細胞數(shù)目進行檢測時，總細胞計數(shù)法的方法有比濁法、涂片計數(shù)法和血球計數(shù)板法，而涂布平板法屬于活菌計數(shù)法。因此，答案選C。
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